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浅谈连续电泳和不连续电泳有什么区别

浏览次数: 次 发布日期:2019-03-05

  连续电泳和不连续电泳有什么区别

  两者区别:

  连续电泳系统分离蛋白质,由于分子筛效应不明显,一般只用于分离组分比较简单的样品,且没有堆积胶的浓缩作用,分辨率较低,加样时必须加成一条极窄的带,以使样品能很好地分离。

  但如果高分辨不是实验目的,用这种方法制胶快而简单。它的另一个优点是在均一系统的电泳中,缓冲系统的精细组成是已知的,且pH是恒定的,这对分离pH敏感的化合物是有帮助的。

  同时可以防止蛋白样品进入凝胶后,由于 pH变化而发生凝聚和沉B淀。另外它不需要像不连续缓冲系统一样去计算不同离子之间的迁移率变化,所以任何一种不同的酸和碱都能使用。

电泳加工

  不连续电泳由于浓缩胶的堆积作用,可使样品(即使是稀样品)在浓缩胶和分离胶的界面上先浓缩成一窄带,然后在一定浓度(或一定浓度梯度)的凝胶上进行分离。

  由于不同孔径凝胶的分子筛作用,使不连续电泳的分辨率大大高于连续电泳。虽然不连续电泳在缓冲系统的选择和制胶(特别是梯度胶)的操作方面比较繁杂,但它可以得到电泳分离最重要的指标--高分辨,因而是目前应用最广泛的技术。

  概念:

  连续电泳是指电泳系统使用相同孔径的凝胶和相同缓冲系统的样品缓冲液、凝胶缓冲液和电极缓冲液,且pH值恒定,只是离子强度不同的区带电泳。

  不连续电泳是指使用不同孔径和不同缓冲系统的电泳。

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